通过血液细胞分析仪对血液流1s-1的研究
加入时间:2011-12-23 16:27:20 当前新闻点击率:5004
普朗医疗器械公司科普 通过血液细胞分析仪研究,血流流1s-1的重要性已经被越来越多的医院所重视,但目前市场上很少见到真正能做到低切变率1s-1的粘度计。许多医院误信了推销员的夸大其辞,所购仪器不能提供真实、可靠的1s-1数据。在此,有必要向用户提供一些鉴定真伪的方法,以使用户及广大患者避免不必要的经济损失及误诊的发生。
首先请切记:实测1s-1的流变仪,它的结构设计应符合公认的测粘原理和科学的计算公式,否则,其质量和使用价值都是不可信的粘度(η)=切应力(τ)/ 切变率(r),请注意公式中的切应力(τ),也称剪切应力,切变应力。对于人体切应力来源于心脏的收缩功能;通过体外诊断试剂对于毛细血管粘度计,该力来源于液层高度;对于旋转式粘度计,来源于转速。那么好,请计算您即将购买的粘度仪,它的切应力是否达到1s-1时的要求。即粘度一定、切变率设1s-1时,切应力等于粘度值。请检查厂家文件,切应力技术指标是否满足范围。国际血液学标准化委员会要求,切应力范围10~1000mPa。
例:粘度油12.28mPaS切变率1s-1 , 此时切应力为12.28mPa,如切应力大于该数据则仪器切应力技术指标达不到实测量1s-1的要求。
其二:在不同切变率下,测试标准油粘度。尤其低切1s-1时检测标准油粘度,低切1s-1时的误差,直接反映了该仪器在1S-1时的参数修正,直接危害患者1s-1粘度的真实性。仪器只有在各个切变率下都能测准标准油,才有可能测准全血粘度。
其三;加入本构方程参数的粘度计测粘时,高、中切值高时,低切才高。而血液粘度告诉我们:高切反应红细胞变形性,低切反映红细胞聚集性;大量临床实践也证明:许多低切高的病人高切是正常的。因此,采用本构方程推算1S-1粘度,可造成大量高切正常低切异常的病人漏诊、误诊。
其四:调整血球压积鉴定法:理论上压积高,全血粘度也会升高。温度37OC时,压积每提高5个单位,观察1s-1时的粘度变化。如是真实数据应变化灵敏,重复性好,反之为模拟数据。
◆细胞聚集性测定方法及其应用
红细胞聚集性是血液非牛顿流动性的重要原因之一,它对于低切变率下的流动性有极大的影响。因此,在血液微流变学的血液细胞分析仪研究中,红细胞的聚集性倍受人们重视,其重要性可与红细胞的变形能力相当。
第一节 红细胞聚集性的粘度测定法
一、 原理
由于在低切变率下红细胞会形成为缗钱状的聚集体,这些网状聚集使血液内部出现了立体结构,因而其流动时的阻力增大。换言之,低切变率下的红细胞聚集使血液粘度升高,其升高程度与聚集程度之间呈正相关。这就是粘度测定可以评价红细胞聚集性的基本原理。
二、方法
1、 低切变率下的血液相对粘度法
根据最近国际上推荐的方法,低切变率下的血液相对粘度可以评价红细胞聚集指数,即ηrel=ηb /ηp ,其中ηrel为相对粘度,ηb为血液粘度,ηp为血浆粘度。测定最好在37℃下进行,切变率可选1S-1,或与此接近的状况。
2、 血液粘度测定法之二—— 红细胞聚集指数R法
本方法由加拿大Brooks提出。他认为在一定切变率下血液的表观粘度与能量耗散率有正比关系,存在红细胞聚集体的悬浮液的能耗高于没有聚集体的细胞悬浮液。因此,聚集与无聚集的细胞悬浮液的表观粘度比值,应当能给细胞聚集程度提供一种度量。为此,他提出红细胞聚集指数R,定义为;R= (η/η0)dex /(η/η0)sal 其中。(η/η0)dex为红细胞悬浮于一定分子量的葡聚糖溶液的相对粘度(η0为葡聚糖溶液的粘度),(η/η0)sal为红细胞悬浮于生理盐水—EDTA溶液中的浓度。不言而喻,两种细胞悬浮液的压积应当相同,例如均选定30%的细胞压积。R的数值与若干因素有关,例如葡聚糖的浓度、切变率的高低,Brooks曾做过一系列血液细胞分析仪实验,我们选其中有代表性的一项,在葡聚糖的浓度为1—8g/100mL及切变率为0.27 S-1——107.5S-1范围内,聚集指数R一般呈现先升后降的趋势,并在葡聚糖浓度为3—4g/100mL处出现一个峰值。R值与切变率的关系也很明显,在较低的切变率下,R值较大,这反映了低切变率下红细胞聚集程度较高的事实。在高切变率下R值小于1,这是由于此时已不存在细胞聚集;另外,葡聚糖溶液作为悬浮剂本身要比生理盐水-EDTA粘度大。
由上可见,为了能评价红细胞聚集程度,我们应该选择那些细胞聚集—解聚共存的条件,也就是较低的切变率与合宜的葡聚糖浓度。例如在1s-1 左右的切变率,以及3g/100ml的葡聚糖浓度。
(1) 准备有关的悬浮剂
配制生理盐水—EDTA溶液,浓度为0.15mol/L NaCl,5mmol/L NaHCO3及1mmol/L Na2EDTA。配制葡聚糖溶液,浓度为1—8g/100mL,葡聚糖分子量为70000。
(2) 制备两种红细胞悬浮剂
用离心洗脱血浆的方式,分别制备红细胞的生理盐水—EDTA溶液悬浮液及相应的葡聚糖悬浮液,一般应加悬浮剂离心洗脱三次。最终的红细胞压积可调节至30%。
(3) 测定红细胞悬浮液的表观粘度
采用旋转式粘度计在低切变率下(例如1s-1)测定两种红细胞悬浮液于37℃(或25℃)下的表观粘度。
(4) 测定两种悬浮剂本身的粘度
用毛细管粘度计分别测定两种悬浮剂的粘度,测定温度为37℃(或25℃)。
(5) 计算红细胞聚集指数
根据上述测定结果,用公式计算聚集指数R。
测定方法与仪器选择
红细胞聚集性不是一个物理学参量,它同液体的比重、温度等物理量不同,后者不论用什么仪器或装置来衡量,最后都可用一个量纲去描写,并且得到的数值也应相同(实际上由于系统误差等因素的影响,不同方法测出的数值只能相近)。正因为如此,我们才可以用不同的方式去描写红细胞的聚集程度,在粘度法中用比粘度(无量纲),在细胞沉降法中用沉降率(mm/h),在形态学方法中用Lamda,d(Heyn),在光密度法中用透光率,等等。任何一种方法的测定结果对红细胞聚集程度的评价上有其共性,它们之间应当有正相关。
值得提出的是,要根据实验目的与设备条件两个因素来选用测定方法。如果主要目的是医学临床检验,可能红细胞沉降率最为简易;如果实验需要了解红细胞聚集的全过程,则可能以形态学方法和光密度方法为佳。如果已经购置了旋转式粘度计,而性能上又能进行低切变率(切变率可选1s-1,或与此接近的切变率)的血液粘度测定,则应以粘度法为该实验室的首选测定红细胞聚集法。因为,这样不仅充分发挥了仪器功能,节省了不必要的添置,而且粘度法与血液的流动性联系最密切,直接把红细胞聚集性对血流的影响反映出来。
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