南京普朗医疗器械公司12月29日讯--人红细胞的寿命一般为120 d，红细胞死亡后变成间接胆红素（I-Bil），经肝脏转化为直接胆红素（D-Bil），组成胆汁，排入胆道，最后经大便排出。间接胆红素与直接胆红素之和就是总胆红素（T-Bil）。上述的任何一个环节出现障碍，均可使人发生溶血性黄疸、肝细胞性黄疸和阻塞性黄疸。肝炎患者的黄疸一般为肝细胞性黄疸，也就是说直接胆红素与间接胆红素均升高，而淤胆型肝炎的患者以直接胆红素升高为主。总胆红素的正常值为1.71～17.1 μmol/L(1～10 mg/L)，直接胆红素的正常值为1.71～7 μmol/L(1～4 mg/L)。因此，临床上对于用测定血清总胆红素来鉴别黄疸有较大意义，它对肝脏疾病诊断、治疗和愈后判断有重要价值。我们对总胆红素试剂盒中试剂的线性和准确性进行研究，不仅可以有效的节约原材料、降低生产成本、规范行业，对临床检验的准确性，也大有帮助。

        1 仪器与试药

        半自动生化分析仪（SECOMAM公司生产，型号：BASIC）；总胆红素测定试剂盒（选用五个厂家生产的，编号依次为1～5号，在这5个厂家生产的试剂盒中，只有两个试剂盒即1号试剂盒和2号试剂盒中自带标准品，其浓度分别为171 μmol/L和20 μmol/L）；总胆红素标准液（中生北控生物科技股份有限公司，批号：070032，浓度：280 μmol/L）；多项液体生化质控血清（四川省迈克科技责任有限公司，批号：0807041，浓度：24.8 μmol/L）。

        2 方法

        2.1 实验原理

        重氮法：总胆红素在二甲亚砜等加速剂作用下，在酸性溶液中与重氮苯磺酸作用生成紫色的偶氮胆红素，与经过同样处理的标准液比较，即可计算出样品中胆红素的含量。

        2.2 试验方法

        2.2.1 线性关系取总胆红素（T-Bil）高浓度样本，通过采用样品量加倍模式（高值血清低于线性范围上限时）或用生理盐水稀释成一系列浓度，最高浓度应大于或等于标准规定线性范围上限值（5个试剂盒的加样量及加样方法详见表1~ 5），每个浓度重复测定2次，取其吸光度平均值与对应的理论浓度值进行回归分析，求相关系数r。

        2.2.2 准确性取一定值血清（浓度为24.8 μmol/L的标准液），按线性项下各表中定标的加样方式和试验步骤进行测定，重复3次，取其均值计算偏差。然后按以下公式计算各样品的检测误差。

        误差=( 测定值-24.81 /24.8)×100%

        3 结果

        3.1 线性

        将试剂盒各浓度吸光度均值与其对应的理论浓度回归，计算回归系数r值，结果见表6。

        3.2 准确性

        检测结果如表所示。（略）

        4 讨论

　　总胆红素标准品很不稳定，根据线性结果来看，虽然相关系数r很好，但吸光度所得值或全部升高或全部降低，即吸光度的增加与其相应的理论浓度不呈正比关系。在有些标准中要求所得值与理论值的偏差应≤10%，如按这一要求来判定线性，总胆红素的线性就远远达不到要求，所以考虑到总胆红素试剂盒这一特殊性，在标准中不但要求r值，同时还应要求所得值与理论值的偏差。

　　在分析方法学上，本次试验采用的是一点定标法。在做线性这一项目检测时，由于总胆红素试剂盒中说明书要求的试剂与标准液的比例较低，这就要求必须要用高浓度的标准液来定标和做线性，但如果用高浓度的标准液定标后，再做准确性时，对准确性的结果影响却非常的大。如果在试验中用高浓度的标准品定标做线性，再用低浓度的标准液定标做准确性，这样得出的结果虽好，但却也失去了检测的意义。对于很多诊断试剂来说，因为考虑到操作简便，标准曲线法基本上是一个被淘汰了的方法。

　　总胆红素浓度在171 μmol/L以内线性良好，高于此值时可用生理盐水将血清稀释后重测，结果乘以稀释倍数，且总胆红素在10～37℃范围内测定不受温度变化的影响，呈色在2 h内非常稳定。在实验中虽然都用的是终点法且反应原理一样，但有些带血清空白，有些又不用带血清空白。因为在试验前都是要清除试剂空白，血清空白对结果到底有怎样的影响还值得研究。

文章来源--普朗医疗器械网编~！