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如何选择酶标仪的测定波长
加入时间：2014-03-27 11:17:49 当前新闻点击率：11034
酶标仪的标准配置包括405nm,450nm,490nm及630nm四块滤光片，具有紫外功能的酶标仪还配备有340nm。
目前用于酶联免疫吸附测定,最常使用的标记用酶是辣根过氧化物酶(HRP)，对应的底物通常为四甲基联苯胺(TMB)和邻苯二胺(OPD)。底物在过氧化氢溶液的存在下，经辣根过氧化物酶作用，分别氧化为2，2，—二氨基偶氮苯(DAB)和联苯醌。
邻苯二胺(OPD)的氧化产物DAB, 在pH值为5．0左右时，在450nm波长处有最大吸收，此时可用450nm的滤光片测定吸光值。当加入强酸作为终止试剂终止反应时，pH值降到接近0，此时最大吸收波长移至492 nm，此时可用492nm的滤光片测定吸光值。
四甲基联苯胺(TMB)的氧化产物联苯醌，一般在波长为450nm处有最大消光系数。使用硫酸作为终止剂可使产物稳定90min，便于检测。
 （普朗医疗品牌产品——酶标分析仪9606）
因此，450nm和492 nm两个波长是目前ELISA测定最常用的。有的酶标仪以490nm滤光片替代492nm滤光片，影响不大。
除了这两个基本滤光片外，考虑到双波长比色的需要，还应有620nm或630nm或650nm和405nm波长的滤光片，双波长比色主要用于消除非特异干扰的影响。
如果一般医院或是医疗器械单位实验室需要用酶标仪作微量生化测定，就需要扩展紫外检测功能，此时需要一个340 nm波长滤光片。
总之，以上介绍的是常用的几个波长的滤光片，用户还可以根据自己的需求选择其他波长的滤光片。一般各种酶标仪都配有放置滤光片的可自动转换的部件，可以同时安装6～8片滤光片，可以满足用户的不同需求。 上一篇:
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