普朗医疗资讯 HLA抗体的临床检测方法
加入时间:2012-01-31 09:28:45 当前新闻点击率:5110
普朗医疗资讯 上面小编已经为大家介绍过了HLA抗体的临床研究意义,接下来,就为大家简单的阐述一下HLA抗体的检测方法和应用。
HLA抗体的检测方法
1 微量淋巴细胞毒实验(CDC):该实验是由美国洛杉矶加州大学的Paul。Terasaki教授于1964年创建。主要原理是淋巴细胞具有HLA抗原,HLA抗体能结合到带有相应抗原的淋巴细胞膜上,补体可以结合并在淋巴细胞膜上使其死亡。如果淋巴细胞不带有相应的抗原,则无此作用。通过染色来观察细胞是否死亡来确定相应的抗原或抗体。该方法可迅速检测患者的HLA抗体,但需要分离细胞,抗原用量大且敏感性不高,多年来在临床广泛应用。
2 酶联免疫法(EL ISA):该实验的基本原理是将HLA抗原包被在一个孔内,将患者血清加入孔中与孔内的HLA抗原反应,通过酶作用使其显色,并利用酶标仪进行检测观察,用荧光仪根据吸收光的不同来判断结果。这种方法无需分离细胞,敏感性也有所提高,无需专门仪器设备,同时可检出HLA-I类和HLA-II类抗体。但该方法操作繁琐,也较费时,一次只能检测一个指标,因此临床应用受到一定限制。
3 流式细胞仪法(F lowCy tom e t ry)及单抗原磁珠法(LuminexTMFlow Cytometry):这两种方法的基本原理都是将HLA单价抗原包被在不同颜色的微磁珠表面,用被检测血清与磁珠反应,血清中HLA特异性抗体便与包被在磁珠上的抗原结合,然后再与标记PE的二抗孵育。根据荧光强弱通过流式细胞仪检测出与这些磁珠对应的HLA抗体。这两种方法在酶联免疫法的基础上使敏感性明显提高,排除其它非反应抗原的干扰,可准确确定HLA抗体的特异性。单抗原磁珠法(L um inexTMF lowCy tom e t ry)在普通流式细胞仪基础上进一步改进,并通过分析软件的更新,对于较弱的反应抗体也能准确检出。
展 望
HLA抗体与输血,妊娠,疾病等的相关性正受到关注,国内HLA抗体检测越来越多的被应用,相信随着血液分析仪研究的深入,许多未知的问题会得到解决。