除了磁珠法提取核酸,现在的核酸提取还用到什么方法
加入时间:2021-01-14 14:16:14 当前新闻点击率:2024
核酸检测流程主要包括标本采样、核酸提取、PCR检测等步骤,在新冠疫情的检测中,通过采集被检测人员的鼻咽拭子,然后将样本送去核酸检测实验室,进行样本核酸提取和检测,其中核酸提取则是连接初始采样与PCR检测的关键步骤,值得重视,那么,核酸提取的方法有哪些呢? 早期的核酸提取方法包括酚抽提法、碱裂解法、CTAB抽提法、煮沸法等。但是由于使用了苯酚、氯仿等有毒挥发性试剂、核酸的回收率较低,损失量大、操作步骤复杂等缺点已经被。 新技术取代,核酸提取目前主要采用的方法有磁珠法和一步法。下面就给大家具体介绍一下这两种核酸提取方法。
磁珠法提取核酸的原理是核酸与磁珠结合,主要依靠静电作用、疏水作用和氢键作用。细胞或组织在裂解液作用下,其中的核酸DNA/RNA被释放出来,此时经过表面修饰的纳米磁珠即与核酸进行特异性结合,形成“核酸-磁珠复合物”。然后在外加磁场的作用下将复合物分离,经过洗脱非特异性吸附的杂质、去盐、纯化后,得到欲提取的核酸。 另外一种常用的核酸提取方法是一步法,该方法在新冠核酸检测中也发挥了快速有效的作用。该方法使用核酸释放剂或裂解液使样本中的待测物从与其他物质结合的状态中释放出来,以便于使用体外诊断试剂或仪器对待测物进行检测。其提取核酸具有简便的优势,整个操作在一个反应管进行,减少操作误差,提高检验结果可重复性。独特的干扰物封闭机制,分离杂质,纯化核酸,避免干扰。适用于设备和专业人员缺少的地区。 随着冬季的来临,核酸检测需求越来越多。临床对分子诊断、核酸检测的高通量、自动化要求的不断增加,传统核酸提取纯化方法操作复杂、提取效率低、不易实现自动化,已不能满足临床诊断需求。新型的高科技分离材料和技术被引入,简便、安全、高效、低成本且适于自动化的核酸分离与医疗设备,将更好的受到临床的欢迎,更多地应用到各个领域。 |