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检验生化分析仪常用分析方法(终点法、固定时间法和动力学法)
加入时间:2022-09-19 15:06:48  当前新闻点击率:1303   标签:检验生化分析仪 

检验生化分析仪是用于临床及专业的化学检测,它通过对血液、尿液、脑脊液等的分析来测定各种生化指标,并结合其它临床资料,进行综合分析,可以帮助诊断疾病,对器官功能做出评价,鉴别并发因子,为疾病的治疗提供基础数据。

检验生化分析仪

检验生化分析仪常用分析方法共有三大类,分别为终点法、固定时间法和动力学法。

终点法: 

指经过一段时间的反应,反应达到平衡,由于反应的平衡常数很大,可认为全部底物(被测物)转变成产物,反应液的吸光度不再变化,只与被测物的浓度有关。这类方法通常称为“终点”法,更确切地说应称“平衡”法。

单试剂单波长终点法:t1时刻加入试剂(体积为V),t2刻加入样本(体积为S),然后搅拌并反应,之后开始测量反应液的吸光度,在t3时刻反应达到终点,t3-t2为测定时间。

反应度:R=At3-At2-1×V/(V+S),或R=At3-ARBLK。

其中:Ati为i时刻的吸光度,ARBLK为试剂空白吸光度。

单试剂双波长终点法:基本上同“单试剂单波长终点法”,只是对于每一个测定周期,其实际吸光度等于Aλ1-Aλ2。

双试剂单波长终点法:t1时刻加入第1试剂(体积为V1),t2时刻加入样本(体积为S)之后立即搅拌,t3时刻加入第二试剂(体积为V2) 并立即搅拌,t4时刻反应达到终点。t3-t2为孵育时间,t4-t3为测定时间。

在项目参数中,如果反应起始时间设为0,则反应度R=A时刻吸光度-双试剂空白吸光度。如果反应起始时间小于0,则反应度R=At4 -双试剂空白吸光度-t3到t2间设定点的吸光度×(V1+S)/(V1+S+V2)。双试剂双波长终点法: 基本上同“双试剂单波长终点法”,只是对于每一个测定周期,其实际吸光度等于Aλ1-Aλ2。

固定时间法:

又称为一级动力学法、二点动力学法等,指在一定的反应时间内,反应速度与底物浓度的一次方成正比,即v=k[S]。由于底物在不断的消耗,因此整个反应速度在不断的减小,表现为吸光度的变化越来越小。这类反应达到平衡的时间很长,理论上可以在任意时间段进行监测,但由于血清成份复杂,反应刚启动时反应较复杂,杂反应较多,必需经过一段延迟时间才能进入稳定反应期。

t1时刻加入试剂(体积为V),之后测量试剂空白的吸光度,t2时刻加入样本(体积为S),t3时刻反应稳定,t4时刻停止对反应进行监测;t2-t3为延迟时间,t3-t4为测定时间。
单波长反应度(单双试剂相同):R=At4—At3

双波长反应度:R=(t4时刻主波长吸光度-t4时刻次波长吸光度)­-(t3时刻主波长吸光度-t3时刻次波长吸光度)

动力学法:

又称零级动力学法,指反应速度与底物浓度的零次方成正比,也就是与底物浓度无关。因此,在整个反应过程中,反应物可以匀速地生成某个产物,导致被测定溶液在某一波长下吸光度均匀地减小或增加,减小或增加的速度(ΔA/min)与被测物的活性或浓度成正比。动力学法也被称为连续监测法;主要用于酶活性的测定。

实际上,由于底物浓度不可能足够大,随着反应的进行,底物消耗到一定程度后,反应速度不再为零级,因此,零级动力学法是针对于特定时间段而言的;同样,由于血清成份复杂,反应刚启动时反应较复杂,杂反应较多,必需经过一段延迟时间才能进入稳定反应期,各试剂商对这两段时间有严格规定。

t1时刻加入试剂(体积为V),t2时刻加入样本(体积为S),t3时刻反应稳定,tn时刻停止对反应进行监测;t3-t2为延迟时间,tn-t3为测定时间。单波长反应度(单双试剂相同)R=(n∑AT-∑A∑T)/[n∑T2-(∑T)2],其中:n=t3到tn间的数据个数 ,T=时间 , A=某一时间的吸光度。双波长反应度基本同单波长,只是某一时间的吸光度等于主波长吸光度减去次波长吸光度。

如今,检验生化分析仪已经走上了快速发展之路,自动化程度更高、分析项目范围更广、配置更方便、分析速度更快、维修也更方便。国产检验生化分析仪品牌有很多,常见的有普朗医疗、迈瑞、库贝尔等等,这些都是国内比较常见的生化分析仪。

其中普朗医疗是成立时间较早、售后较为完善的一家医疗器械厂家,检验生化分析仪从半自动到全自动多个型号可选择,公司生产的PUZS-600系列全自动生化分析仪拥有可靠的光学系统;稳定的反应系统;灵活准确的前处理系统;完善高效的的清洗系统;易用便捷的软件操作系统等优势。自问世以来,此款设备备受是国内各大研究机构及医院信赖选。


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