酶联免疫检测仪即酶标仪，是酶联免疫吸附试验的专用仪器，属于生命科学仪器的一类。目前，酶联免疫检测仪广泛地应用在临床检验、生物学研究、农业科学、食品和环境科学中，特别在近几年中，由于大量的酶联免疫试剂盒的应用，使得酶联免疫检测仪在生殖保健领域中应用越来越广泛，同时促进了生殖健康技术水平提高。

那么，实验室如何选择酶联免疫检测仪的测定波长？

一般酶联免疫检测仪的测定波长在400～750nm或800nm之间，完全可以满足ELISA的显色测定。目前国内常见的ELISA试剂盒所使用的标记用酶均为辣根过氧化物酶(HRP)，底物通常为四甲基联苯胺(TMB)和邻苯二胺(OPD)，其在过氧化氢溶液的存在下，经HRP作用，分别氧化为2，2，—二氨基偶氮苯(DAB)和联苯醌。当pH值为5．0左右时，DAB在450nm波长处有吸收，当pH值降为L 0时，吸收波长移至492 nm，同时摩尔消光系数变大，显色加深，因而常用强酸如硫酸或盐酸终止反应。TMB的氧化产物联苯醌在波长450nm处有消光系数，如果HRP量少，H：O：和TMB过量时，则形成蓝色的阳离子根。

降低pH，即可使蓝色的阳离子根转变为黄色的联苯醌，使用硫酸作为终止剂可使产物稳定90min。因此，450nm和492 nm两个波长是目前ELISA测定常用的。各种酶联免疫检测仪都配有放置滤光片的可自动转换的部件，可以同时安装6～8片滤光片，所配备的滤光片均应包括上述两个波长，有的酶联免疫检测仪以490nm滤光片替代492nm滤光片，影响不大。

除了这两个基本滤光片外，考虑到双波长比色的需要，还应有620nm或630nm或650nm和405nm波长的滤光片，其他滤光片可根据自己的需要选择。有时，有的实验室希望用酶联免疫检测仪作微量生化测定，故酶联免疫检测仪生产厂家对其生产的酶联免疫检测仪扩展了紫外检测功能，此时需要一个340 nm波长滤光片。此时，酶联免疫检测仪的测定波长范围就成为340—750nm或800nm。

酶联免疫检测仪有单波长和双波长检测功能。有时使用者不知在什么情况下使用单或双波长检测。所谓的“单波长”就是使用一种对显色吸收的波长即450 nm或492 nm进行比色测定；而“双波长”则除了用对显色吸收的波长即450 nm或492 nm进行比色测定外，同时用对特异显色不敏感的波长如630 nm进行测定，酶联免疫检测仪打印出来的吸光度则为二者之差。630 nm波长下得到的吸光度是非特异的，来自于板孔上诸如指纹、灰尘、脏物等所致的吸收。因此，在ELISA比色测定中，使用双波长，且不必设空白孔。