近年来，酶标仪的功能逐渐增多，应用领域也不断得到拓展。其中常见的多功能酶标仪为具有光吸收（ABS），荧光强度（FL）和化学发光（LUM）基础三功能酶标仪，光吸收主要用于检测OD值，包括Elisa，酶活，酶动力学，OD600等，荧光与化学发光则检测的是荧光强度。

那荧光与化学发光有什么区别呢，什么实验该用荧光检测，什么又该用化学发光检测呢？

首先，荧光是被激发后，酶标仪检测发射光的荧光强度，例如，荧光染料Hoechst，PI，Calcien AM等以及荧光报告基因GFP，RFP等；化学发光是指通过化学反应或生物化学反应发出的可见光，与荧光相比不需要激发光，所以具有更低的背景。

荧光原理：荧光是短波长的光激发，电子从基态跃迁至激发态，激发态不稳定，电子需要重新回到基态，这时损失的一部分能量，会以荧光的形式呈现。

荧光检测原理

化学发光原理：按原理可以分为两类，其中一类为化学反应发光，常见是鲁米诺的反应发光，另外一类为生物化学发光，例如萤火虫荧光素酶，海肾荧光素酶。

化学发光检测原理

下面我们来看一下荧光与化学发光都有哪些应用？

一. 荧光

1. 细胞活力，毒性检测方法

实验原理：荧光强度与活细胞数成正比、灵敏度高、特异性好、组合成复合荧光染料使用。例如：根据细胞膜完整性差异，荧光染料（Calcein AM，EthD-III）对活细胞/死细胞的穿透特性不同，对其进行特异性标记，有常规荧光染料也有优化试剂盒。

2. 活细胞中荧光蛋白的表达

荧光蛋白在监测生物体内研究中，起到越来越重要的作用，随着时间的推移，目前可以使用的荧光蛋白的种类也越来越丰富。他们都可以在众多细胞和组织中被克隆复制，稳定且毒性小，不需额外辅助也可在体内产生荧光。

例如：GFP报告基因是一种同时编码GFP和靶标序列的基因， 把GFP的编码序列和基因表达调节序列相融合形成嵌合基因，或与其它目的基因相融合，在调控序列控制下进行表达，通过检测GFP的荧光强弱来标定目的基因的表达调控

二．化学发光

1.  双荧光素酶报告基因

报告基因一般用来研究真核生物的基因表达，在双报告基因实验中，细胞需转染两种质粒，一种含有目的基因调控的启动子，另一种包含一个质控基因的组成型启动子，将两个报告基因共转染，可以更好的减小实验误差。

Promega的双报告基因实验（DLR）允许使用者在一个微孔板中分别检测萤火虫和海肾荧光素酶，其中萤火虫作为报告基因，海肾作为质控基因，分别进行两次化学发光读数。

2. 鲁米诺试剂—化学发光

ELISA化学发光夹心法试剂盒QuantiGlo luminescent ELISA (R&D Systems) ，通过化学反应产生荧光，可以用来检测人类VEGF，内皮素-1，IL-6，IL-8，IL-1，IL-2，TNF-alpha等。