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血凝分析仪的生物化学法的三种形式
加入时间:2012-07-17 09:35:04  当前新闻点击率:4759
大家都知道血凝分析仪也就是血凝仪,血凝分析仪的生物化学法是通过测定产色底物的吸光度变化来推测所测物质的含量和活性的,该方法又可称为底物显色法。
血凝分析仪使用产色底物检测血栓与止血指标的原理是:通过人工合成与天然凝血因子有相似的一段氨基酸排列顺序并还有特定作用位点的小肽,并将可水解产色的化学基因与作用位点的氨基酸相连。测定时由于凝血因子具有蛋白不解酶的活性,它不仅作用于天然蛋白质肽链,也能作用于人工合成的肽段底物,从而释放出产色基因,使溶液呈色。产生颜色的深浅与凝血因子活性成比例关系,故可进行精确的定量。目前人工合成的多肽底物有几十种,而最常用的是对硝基苯胺(PNA),呈黄色,可用405mm波长进行测定。
普朗医疗器械专家指出血凝分析仪生物化学法通常使用以下三种形式:
第一、先将被检血浆中的某种酶加以激活,然后由此活化的凝血因子对人工合成的底物进行水解而呈色,如纤溶酶原,蛋白C测定等。
第二、向被检血浆中加入过量的有关试剂,以中和相应的抗凝因子,然后测定其残余的酶活性,如AT-活性测定,α2-抗纤溶酶测定,肝素测定等。
以测定抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)为例,在反应体系中加入过量的凝血酶,后者与血浆中的AT-Ⅲ形成1:1复合物,剩余凝血酶作用于合成的凝血酶底物S-2238(H-D-Phe-Pip-Arg-PNA·2Hcl),释放出显色基团PNA,显色反应的深浅与剩余凝血酶的量呈正相关,而与AT-Ⅲ的活性呈负相关。
第三、直接测定被检血浆中某种蛋白水解酶的活性,如凝血酶,Xa,尿激酶测定等。
血凝分析仪生物化学法灵敏度高、精密度好,而且易于自动化,为血栓/止血检测开辟了新途径。
 

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