400 696 6267
|
酶标仪通道差与孔间差检测问题剖析
加入时间：2012-08-15 14:42:56 当前新闻点击率：5711
酶标仪通道差与孔间差检测问题剖析，具体内容如下所示：
一、酶标仪通道差检测：取一只酶标板（酶标板是通过洗板机来清洗的，一般是辅助酶标仪使用实现蛋白含量测定的医疗器械）小孔杯（杯底须光滑、透明、无划痕、无污染）以酶标板架作载体，分别加入三种不同浓度的甲基橙溶液 200 ul先后置于8个通道的相应位置，蒸馏水调零，采用双波长（测定波长490nm，参比波长630或650nm，以下均相同）连续测三次，观察其不同通道之间测量结果的一致性可用极差值来表示其通道差。
为了提高酶标仪的检测速度，根据 96孔酶标板的规格特点，目前大多数厂家的中、高档酶标仪均采用8通道的检测器（部分中、低档酶标仪目前仍采用单通道）。因而它们每个通道的检测能力是不尽相同的，它是仪器内部的固有误差，与所测溶液浓度成正相关（不同检测器对不同浓度溶液的响应能力不同），所以通道差是衡量酶标仪性能良好与否的重要指标之一；其衡量指标用极差表示，这与厂家推荐的指标是一致的；极差值越接近于零，通道差越小，说明同一样品于不同通道检测结果的一致性越好。
二、酶标仪孔间差的测量：选择同一厂家、同一批号酶标板条（8条共96 孔）分别加入200 ul甲基橙溶液（吸光度调至0.065～ 0.070 A）先后置于同一通道，蒸馏水调零，采用双波长检测，其误差大小用±1.96s衡量。
由于不同厂家、不同批号酶标板之间的质量差异，导致孔与孔之间的检测结果也不完全一致，这与水平光路光度计的比色皿质量是否符合要求一样，因此我们认为孔间差是酶标仪外部的固有误差，只有准确测知孔间差，并对结果作出相应的校正，才能使检验结果更符合实际情况、更准确可靠；采用的评价指标（士1.96 s）也是有利于结果校正的。另外，在设计孔间差测量的操作方法上，我们将200 ul甲基橙溶液吸光度调至 0.065～0.070 A，是充分考虑到加样器的误差，其目的是使加样误差控制在酶标仪的分辨率（0.01 A）以下，这样也就避免了孔间差结果不因加样误差而导致假性增高。
|
