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为什么利用血细胞分析仪准确计数血小板越发重要?
加入时间:2011-12-15 09:06:57  当前新闻点击率:4645

   普朗医疗器械公司资讯 近年来,如何利用血液细胞分析仪准确计数外周血中的血小板,已成为血液学和检验医学界的热门话题。

    为什么精确计数血小板如此的重要呢?其原因有二:一是临床上需要输血小板者日益增多,仅在美国,每年输血小板 就达700多万单位以上。由于输注血小板价格高昂,且易发生免疫性输血反应和存在感染的风险,故英、美等国,近年来纷纷提出降低输血小板的起点 (triggerpoint)或门(threshold),由过去的20×109 /L降至10×109 /L,甚至5×109 /L,因此迫切要求准确计数血小板。二是迄今为止,所有计数血小板的方法,对于血小板减少的标本,其准确性都比较差,亟需研究改进。

    准确计数血小板实非易事。血小板体积小、无色、易粘附。通过血细胞分析仪检测,当血液自血管破损处流出时,血小板一经与破损的血管内皮细胞及组织成分接触,立即以极快的速度粘附 于破损的血管壁。因此,无论用何种方法采血,所数得血小板数,均较血中实际血小板数为低,皮肤穿刺采血比静脉穿刺更低。此外,血小板易发生聚集,通常我们 在血涂片或骨髓涂片上所见到的血小板,很多是几个聚集在一起的,制片耽搁时间越长,聚集越多。更重要的是,目前所有的血小板计数方法,都存在不少缺陷。

    世界卫生组织(WHO)推荐的血小计数方法,有人称它为国际参考方(下称参考方),是用Ig/dl的草酸铵溶液作溶血-稀释剂,在相差显微镜下,用血细胞 计数板肉眼计数。和一切手工计数法一样,该法除了细胞在计数板上散布的天然误差之外,最大的缺点是计数的血小板太少。例如,一个重度血小板减少的患者,如 果血小板计数为10×109 /L,实际上在镜下只数到10个血小板,复性很差。据Harrison称,这一方法在不同的操作者之间的变异系统(CV)可达10%-25%。自动化的血液分析仪,无论是阻抗法还是光散射法,对于血小板数及形态正常的标本,结果一般比较可靠,但对于血小板明显减少和/或形态异常者,所得结果误差甚大,有时 甚至难以计数。其原因是:这些方法基本上都是依据细胞的近似血小板的所谓“非血小板颗粒”(nonplatelet particles,简称NPPs),如小红细胞、红细胞碎片、白细胞碎片、细菌和真菌以及免疫复合物等,会被当作血小板加以计数,从而使血小板数假性增 多。Hammerstrom在一例急性髓细胞白血病(M5型)合并DIC患者的外周血片中,发现大量大小近似血小板的小体。经用细胞化学染色、免疫组化染 色等多种方法鉴别,发现其中约1/3与白细胞反应相同;继用抗血小板抗体作免疫组化染色,仅4%呈阳性。证明这种物体,大多数是白细胞或红细胞碎片而非血 小板。另一方面,正常人血小板体积相差甚大,可自2fL至 20fL以上。其体积分布直方图不是对称的,而是明显地向右延伸,即都存在一定数量的大血小板。在病理情况下,如原发性血小板减少性紫癜、急性心肌梗塞、 糖尿病等,大血小板会增多。由于大部分血液分析仪不能将大血小板与小红细胞等分开(只能提示可能有大血小板存在),致使许多大血小板被当作红细胞而未计入 血小板总数中,从而使血小板计数结果偏低。

    由此可见,要想在日常用的血液分析仪上,用一般方法,达到准确计数血小板是不可能的,必须另辟蹊径。

    目前已报道的准确计数血小板的方法,大体上有两大类。一是免疫学方法,即用荧光标记的抗血小板抗体,特异地着染血小板,在流式细胞仪(FMC)或特定的血液细胞分析仪上计数血小板。二是用二维激光散射(two-dimensinal laser light scatter)测定法,将血小板与NPPs分开,达到准确计数。

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